什么是ORNs？ORNs的作用是什么1、什么是ORNs？ORNs的來源是什么？ ORNs（oligoribonucleotides）寡核糖核苷酸，它們現在被認為當遇到正常和自然發生的壓力時，細菌會釋放被稱為壓力反應因子的產物（也稱SRFSs）。這些產物包括①核酸聚合物及其部分水解物和完全水解物，如寡聚蛋白分子量<10 kDa，特別是分子量在 500-3000 Da 之間的低聚物[1，2]。②包括大約12種低聚核糖核苷酸（ORN）的混合物，范圍從1-30個核苷酸不等。人稱它們為sRNA、microRNA。[2] ORNs主要來源于：①壓力環境下（如中性pH、口腔、PBS、耳朵、鼻子、陰道等）釋放：pH值為4.8時所釋放的活性氧約為pH值為7.6時的四分之一。②溫度：在40℃下可以觀察到釋放，并且比在低于37℃（例如22-32℃）的溫度下繁殖的菌產生更強的ORNs。③時間：接觸壓力環境釋放立即開始，5到20分鐘的短時間連續壓力即產生。[2]
2、ORNs的作用是什么？ （1）加速菌株適應新的環境并加速進入對數期 釋放ORNs后，乳酸菌重新移入新的培養基后很快進入對數期，而控制組長時間處于生長停滯。我們的益生菌在口腔中經過唾液的壓力釋放ORNs，使得菌進入胃腸時，更容易定植，更快速發揮菌本身的作用。[2] （2）增強免疫力--激活巨噬細胞+樹突狀細胞 ①口腔粘膜的免疫細胞檢測到游離的ORNs，免疫哨兵細胞釋放細胞激素活化抗感染和慢性炎癥的免疫反應。同時啟動B和T細胞來促進抗體產生，平衡幫手/殺手T細胞，啟動中性粒細胞殺滅細菌。強化防御機制和避免感染和慢性發炎。[2] ②哨兵細胞（巨噬細胞+樹突細胞等），在識別病原體和損傷信號時扮演著重要角色。這些細胞能夠激活巨噬細胞釋放低濃度炎癥因子如白細胞介素-6 (IL-6) 和白細胞介素-1α (IL-1α) 來激活免疫反應，調節炎癥過程。人類哨兵細胞經Lact ORNs處理后釋放IL-6和IL-1α以調節炎癥，ORNS濃度越高，越能激活哨兵細胞釋放炎癥因子，進而激活免疫反應，調節炎癥過程。[1，2]
③下調巨噬細胞的CD-14受體，以防止由內毒素引起的過度刺激，導致與全身性炎癥、心血管功能障礙、休克，防止IL-1、IL-6和TNF的過度產生。下調巨噬細胞的CD-16受體，以防止由IL-10引起的過度刺激，導致巨噬細胞過度轉化為其細胞毒性表型，可能過度破壞宿主細胞，例如血管內皮細胞和T細胞。[1，2]
④增強益生菌的耐受性和腸道定植能力：Lact ORNs生產調控技術，所生產益生菌含有高活性ORNs，活性ORNs可促進益生菌于腸道定植能力，并加倍強化抗病毒/細菌及免疫調節效能。[2] ⑥免疫能力評估： 葡聚糖是一種多糖，具有顯著的免疫刺激作用。β-葡聚糖能夠激活人體的免疫系統，特別是巨噬細胞和自然殺傷細胞，增強這些細胞對病原體的清除能力。它還能促進T細胞和B細胞的活化，提高抗體的產生。與葡聚糖比，ORN的免疫刺激能力更顯著！
（3）增強免疫力--激活中性粒細胞PMNs[3] ①抵抗多種微生物感染： 所有的細菌復制起始位點位于復制原點。ORNs通過與細菌復制起始點的部分互補的多核苷酸接觸，第一步，阻止細菌進行復制，通過降低細菌的生長率，達到抵抗多種微生物感染。第二步，刺激中性粒細胞，“刺激”是指促進或增加中性粒細胞的活性，例如產生活性氧物種和/或增加氧化爆發。中性粒細胞活性的促進或增加可以通過使中性粒細胞與ORNs有效量接觸來實現。[3] ②中性粒細胞作用機理 中性粒細胞通過吞噬和降解功能來對抗感染因子。作為對抗感染因子的反應的一部分，它主要通過釋放一系列氧化產物（對細菌致命）來殺死病原體。[3] 間質空間打開，允許中性粒細胞到達感染部位，在那里它們可以吞噬微生物，將其保持在液泡中，并釋放活性氧中間體（如超氧化物、過氧化氫和羥基自由基）轟擊它。抗微生物蛋白和殺菌酶如髓過氧化物酶也被使用。[3] ③增強免疫系統 用與復制起始位點的共識序列互補的本發明的多核苷酸進行治療可以刺激免疫系統， 從而使其能夠抵抗多種微生物感染。中性粒細胞是代表宿主細胞防御第一道防線的細胞之一。它們屬于抵抗細菌、病毒和真菌感染的免疫崗哨細胞家族，像其他吞噬哨兵細胞一樣，中性粒細胞可以嵌入組織中或在組織的間隙中移動。[3] （4）修復LPS（脂多糖，又稱內毒素）對機體的損傷： LPS（脂多糖，又稱內毒素）是革蘭氏陰性細菌外膜的一個成分，常用于測試免疫系統的強度。給小鼠喂食高劑量的 LPS 可誘導致死性膿毒性休克。經過3次動物實驗ORNs讓小鼠恢復了穩定的免疫狀態，從而防止了注射 LPS 時產生的狂亂自毀反應。[1，2，3] （5）總結 ①刺激動物免疫系統以提供對微生物入侵、毒素（如內毒素）的致死性、自身免疫疾病的發生以及其他由不受限制的免疫系統引起的疾病的保護； ② 刺激動物免疫系統發揮其最大潛能，使免疫系統以全部力量應對感染； ③調節動物免疫系統以調整巨噬細胞上個別表面受體的表達，以重新定位功能失調的免疫系統； ④調節動物免疫系統以拯救單核細胞免于凋亡； ⑤刺激巨噬細胞釋放白細胞介素并下調表面受體； ⑥中性粒細胞功能在體外、體內或離體環境中，使中性粒細胞被刺激以增加氧氣攝取和/或釋放氧化因子； ⑦刺激樹突狀細胞釋放信號白細胞介素； ⑧作為佐劑，通過增加對已知抗原的抗體的產生； ⑨調節或防止受攻擊的免疫系統出錯并導致宿主死亡。
3、建議食用量是多少？[1，2，3] 活菌數的量：5*109 - 3* 1010cfu/ml 109穩定菌釋放1 AU的ORNs。 0.2-20%在0.5 - 10 kDa之間的低聚物，0.5 - 95%小于0.5 kDa的單體（這些部分中的每一個都由核酸、肽聚糖和不同分子大小的肽組成）組成
4、ORNs的安全性驗證 將ORNs喂食或注射到小鼠體內時是無毒的，并保護它們免受隨后注射內毒素的致命挑戰。[2，3] 批注： 1.Methods and compositions for modulating immune systems of animals，US 5,840,318 2.Oligoribonucleotides alert the immune system of animals to the imminence of microbial infection US 7,189,834 B2 3.Polycarbonates with fluoroalkylene carbonate end groups,US 7,687,557B2 |
